RP58 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407058

Descripción general

ZBTB18 codifica el represor transcripcional RP58, con dedos de zinc y dominio BTB, un regulador nuclear que modula programas de expresión génica que gobiernan el desarrollo neural, la especificación del destino celular y la diferenciación. RP58 contribuye al control transcripcional asociado a la cromatina al reclutar la maquinaria correpresora y al dar forma a redes transcripcionales específicas de linaje que influyen en la proliferación y la maduración. En células humanas, la actividad alterada de ZBTB18/RP58 se ha vinculado con procesos neurodel desarrollo desregulados y con estados transcripcionales aberrantes observados en contextos de enfermedad, lo que la hace relevante para estudios de la arquitectura reguladora de los genes. Sus efectos aguas abajo se entrecruzan con vías que controlan la maduración neuronal, la dinámica del ciclo celular y la programación epigenética.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RP58 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZBTB18 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZBTB18 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZBTB18 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RP58.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZBTB18 para la investigación de la señalización de RP58, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZBTB18 críticos para la función de RP58
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZBTB18 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RP58 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RP58 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZBTB18. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RP58 (h) y el plásmido HDR RP58 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZBTB18 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZBTB18 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.