RNF213 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418450-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF213O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF213 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF213 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF213. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RNF213 Anticorpo (5C12): sc-293391
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF213 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418450-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF213 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418450-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF213 codifica uma grande ligase E3 de ubiquitina contendo domínio RING finger e uma ATPase AAA+, que contribui para a regulação dependente de ubiquitina da degradação/renovação de proteínas e da sinalização responsiva ao estresse. RNF213 tem sido implicado em vias que coordenam a homeostase endotelial e vascular, a sinalização inflamatória e as respostas celulares à hipóxia e ao estresse metabólico, em consonância com papéis no remodelamento angiogênico. Variações genéticas e alterações na função de RNF213 estão fortemente associadas à doença de Moyamoya e a outros fenótipos cerebrovasculares e vasculopáticos, o que motiva estudos mecanísticos em modelos celulares humanos relevantes. Além disso, a atividade de RNF213 tem sido relacionada à modulação de vias da imunidade inata, tornando-o um nó útil para dissecar a comunicação cruzada entre ubiquitinação, inflamação e biologia vascular.
RNF213 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF213 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF213. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF213. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF213 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.