Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RMP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406916-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RMPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RMP (h) e o Plasmídeo Double Nickase RMP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para URI1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RMP Anticorpo (D-2): sc-376011
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RMP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406916-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RMP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406916-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O URI1 humano codifica o “unconventional prefoldin RPB5 interactor 1” (RMP), um fator multifuncional que se associa à RNA polimerase II por meio de RPB5 e contribui para o controlo transcricional, a proteostase e as respostas celulares ao stress. O RMP participa em redes regulatórias que influenciam vias de crescimento e sobrevivência celular, incluindo a modulação da sinalização de recetores nucleares e das respostas a stress genotóxico ou metabólico. Alterações na atividade de URI1/RMP têm sido descritas em contextos de proliferação desregulada e sinalização oncogénica, tornando-o um nó útil para estudar o acoplamento entre transcrição e metabolismo. A investigação experimental de URI1 apoia estudos sobre reprogramação de vias, dinâmica de complexos proteicos e mecanismos que sustentam estados celulares aberrantes.
RMP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus URI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de URI1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função URI1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com URI1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.