Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RFC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403956
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RFC4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RFC4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RFC4 Anticorpo (C-9): sc-28301
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RFC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403956 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RFC4 (fator de replicação C, subunidade 4) é um componente central do complexo carregador de grampo RFC, que carrega o PCNA no DNA com primer, permitindo a síntese processiva de DNA durante a replicação e coordenando o reparo de DNA. Por meio de interações dependentes de ATPase com o PCNA e com as DNA polimerases, o RFC4 sustenta a progressão da fase S, a estabilidade da forquilha de replicação e respostas associadas a checkpoints frente ao estresse de replicação. A disrupção de RFC4 perturba a dinâmica da replicação do DNA e pode aumentar a instabilidade genômica, ligando a função do complexo RFC a vias comumente alteradas em distúrbios proliferativos. Como parte da rede mais ampla de replicação e reparo de DNA, o RFC4 é frequentemente estudado no contexto da regulação do ciclo celular e de respostas ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RFC4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RFC4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RFC4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RFC4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RFC4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RFC4 para a investigação da sinalização de RFC4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RFC4 críticos para a função RFC4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RFC4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RFC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RFC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RFC4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RFC4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RFC4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RFC4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RFC4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.