Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rent1 Antibody (C-6): sc-393594. Western blot analysis of Rent1 expression in K-562 (A), Raji (B), HeLa (C) and C3H/10T1/2 (D) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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Rent1双切口酶质粒(h): sc-402462-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rent1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Rent1双切酶质粒（h）和Rent1双切酶质粒（h2）编码针对UPF1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rent1: sc-393594，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rent1双切口酶质粒(h) | sc-402462-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rent1双切口酶质粒(h2) | sc-402462-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UPF1（Rent1）编码一种RNA解旋酶/ATP酶，是无义介导的mRNA降解（NMD）的核心组分。NMD是一条保守的RNA监视通路，能够识别提前出现的终止密码子，并促进异常转录本的降解。UPF1通过与翻译终止因子及SMG1、SMG5/6/7、UPF2、UPF3等NMD组分协同作用，调控转录组质量控制、mRNA周转以及蛋白质稳态。UPF1的活性还与DNA损伤应答、端粒维持及抗病毒RNA限制等过程相交汇，将RNA代谢与更广泛的细胞应激通路联系起来。NMD失调及UPF1依赖的RNA加工异常已在神经发育表型、肿瘤生物学和病毒感染研究中被关联，因此UPF1成为人类细胞中进行机制研究时广泛使用的靶标。
Rent1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 UPF1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对UPF1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏UPF1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了UPF1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。