RelB CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422643

概要

RelbはRelBをコードしており、RelBはNF-κB/Relファミリーに属する因子で、主として非カノニカルNF-κB経路で機能します。RelBは一般にp52（NFKB2）とヘテロ二量体を形成し、BAFFR、CD40、LTβRなどの受容体下流の炎症シグナルにおいて、樹状細胞の成熟、リンパ組織形成、B細胞の生存を制御する転写プログラムを調節します。マウス系では、RelBの活性はサイトカインおよびケモカイン発現を形成し、抗原提示にも影響を与えることで、自然免疫と獲得免疫のクロストークをつなぎます。RelB依存的シグナルの異常は、過剰な免疫活性化や免疫発生の障害と関連しており、Relbは炎症ネットワークや免疫細胞分化の機構研究に有用な標的となります。

RelB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRelb遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Relb内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Relbのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RelBタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RelBシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Relb欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RelBの機能に不可欠なRelbエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Relbゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RelB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRelB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Relb遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RelB HDRプラスミド（m）および RelB HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRelbホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRelb標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。