Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417299

概要

RXFP1はリラキシン受容体1をコードする遺伝子で、リラキシンファミリーペプチドに結合するGPCRです。これによりcAMP/PKAおよびMAPKシグナル伝達、 一酸化窒素（NO）産生、ならびに細胞外マトリックス（ECM）リモデリングに影響する転写プログラムを調節します。線維芽細胞、平滑筋細胞、血管系細胞において、RXFP1の活性はTGF-β/SMADやインテグリン連関経路とのクロストークを介して、細胞移動、接着、マトリックスのターンオーバーを調整します。RXFP1シグナルの変化は、線維化応答や結合組織の恒常性の破綻と関連づけられており、臓器線維化、血管生物学、生殖器系生理の研究において重要です。また、状況に応じてシグナルのバイアスが変化する細胞表面受容体として、GPCRの脱感作、内在化、下流エフェクターとのカップリングを解析する目的にも用いられます。

Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRXFP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RXFP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RXFP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Relaxin Receptor 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Relaxin Receptor 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RXFP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Relaxin Receptor 1の機能に不可欠なRXFP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RXFP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRelaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RXFP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Relaxin Receptor 1 HDRプラスミド（h）および Relaxin Receptor 1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRXFP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRXFP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。