RANKL Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400304-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RANKLO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RANKL (h) e o Plasmídeo Double Nickase RANKL (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFSF11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RANKL Anticorpo (G-1): sc-377079
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RANKL Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400304-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RANKL Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400304-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFSF11 codifica o ligante do receptor ativador de NF-κB (RANKL), uma citocina transmembranar do tipo II e também solúvel, da superfamília do TNF, que sinaliza por meio de TNFRSF11A/RANK para regular a diferenciação, a ativação e a sobrevivência de osteoclastos. A ligação RANKL–RANK desencadeia a sinalização canônica e não canônica de NF-κB, bem como programas de sinalização por MAPK e de transcrição mediados por NFATc1, coordenando a remodelação óssea e o acoplamento com a função de células imunes. A desregulação da sinalização de RANKL está fortemente associada à osteólise inflamatória e a processos de perda óssea, incluindo osteoporose e erosão articular ligada à artrite reumatoide, e contribui para microambientes osteolíticos associados a tumores. Como o RANKL também modula interações entre células dendríticas e células T e a remodelação específica de tecidos, TNFSF11 é amplamente estudado em modelos de osteoimunologia e biologia esquelética.
RANKL O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFSF11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFSF11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFSF11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFSF11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.