RANK Lentiviral Activation Particles (h): sc-400559-LAC

ヒトTNFRSF11AはRANK（receptor activator of NF-κB）をコードしており、RANKはTNF受容体スーパーファミリーに属する分子で、RANKL依存的なシグナルを伝達して破骨細胞の分化・生存および骨リモデリングを制御する。RANKのリガンド結合により、カノニカルおよびノンカノニカルのNF-κBシグナルが活性化され、さらにMAPK経路やPI3K/AKT経路ともクロストークして、免疫細胞間コミュニケーションと組織恒常性を制御する転写プログラムを協調的に調整する。RANK経路活性の異常は、骨代謝回転の異常や炎症性微小環境に関連することが示されており、骨格生物学と免疫シグナルの接点を扱う文脈で頻繁に研究されている。明確に規定されたリガンド—受容体ダイナミクスをもつ膜受容体として、RANKは骨免疫学やNF-κB駆動性遺伝子ネットワークの機構研究に取り組むための扱いやすい入口となる。

RANK レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なTNFRSF11Aの発現上昇を可能にします。

RANK レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、TNFRSF11A転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性RANKの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のTNFRSF11Aゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。