Ran BP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422595

概要

Ranbp1 は、Ran 結合タンパク質 1（Ran BP-1）をコードしており、RanGTP/RanGDP の動態を調節することで核-細胞質間輸送を協調的に制御する、Ran GTPase サイクルの保存された制御因子である。Ran および RCC1/RanGAP 依存性プロセスとの相互作用を介して、Ran BP-1 は核内輸送／核外輸送、紡錘体形成、有糸分裂の進行に寄与し、輸送制御と細胞周期の正確性を結び付けている。Ran 経路の攪乱はゲノム安定性や増殖を損ない得るため、Ranbp1 の機能は発生異常やがん化（腫瘍性形質転換）の研究において重要である。マウス系では、Ran BP-1 は核輸送依存的なシグナル伝達や細胞分裂表現型の文脈でしばしば検討される。

Ran BP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRanbp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ranbp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ranbp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ran BP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ran BP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ranbp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ran BP-1の機能に不可欠なRanbp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ranbp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ran BP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRan BP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ranbp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ran BP-1 HDRプラスミド（m）および Ran BP-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRanbp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRanbp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。