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Rad51C双切口酶质粒(h) | sc-403060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad51C双切口酶质粒(h2) | sc-403060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD51C 编码 Rad51C 蛋白,它是 RAD51 的一个旁系同源物,参与同源重组以及 Fanconi 贫血–BRCA DNA 修复网络,用于解决 DNA 双链断裂和链间交联。Rad51C 参与 RAD51 丝状复合体的动态调控与 Holliday 结的加工处理,在 S/G2 期维持复制叉稳定性并保障基因组完整性。RAD51C 功能受损与 DNA 损伤应答缺陷、染色体不稳定性以及对基因毒性应激敏感性增加有关,使其成为调控复制应激耐受通路中的关键节点。这些特性将 RAD51C 与遗传性肿瘤易感机制及 DNA 修复相关疾病联系起来,也支持将其用于研究基因组维护相关表型。
Rad51C 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RAD51C 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAD51C内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RAD51C的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RAD51C基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。