Rab11-FIP5慢病毒激活颗粒(h): sc-407779-LAC

RAB11FIP5 编码 Rab11-FIP5，这是一种与 Rab11 家族相互作用的蛋白，在 Rab11 依赖的回收内体运输中作为效应蛋白发挥作用。通过将 Rab11 阳性膜结构与马达蛋白及系链（tethering）机制连接起来，Rab11-FIP5 有助于协调货物分选、内吞回收以及维持细胞极性、胞质分裂和受体更新所需的膜递送。这些过程与调控信号强度和膜组成的囊泡运输网络相互整合，使 RAB11FIP5 成为研究内体通路调控的一个有用节点。内吞回收失调已被认为与多种疾病相关表型有关，包括受体信号改变、异常细胞迁移以及免疫细胞功能变化。

Rab11-FIP5 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RAB11FIP5 表达。

Rab11-FIP5 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在RAB11FIP5转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Rab11-FIP5表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 RAB11FIP5 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。