Rab 5A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417949-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 5AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab 5A (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rab 5A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAB5A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 5A Anticorpo (C-3): sc-515401
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 5A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417949-NIC | 20 µg | $410.00 |
RAB5A codifica a Rab5A, uma pequena GTPase que atua como regulador central da endocitose precoce e do tráfego de membranas endossomais. No estado ligado a GTP, a Rab5A coordena a internalização mediada por clatrina, a fusão de endossomos precoces e a triagem de cargas ao recrutar efetores que controlam o ancoramento de vesículas e a sinalização por fosfoinositídeos. Por meio dessas funções, influencia a renovação de receptores e a dinâmica da transdução de sinais em vias como o tráfego de receptores de fatores de crescimento e a maturação de endossomos. A atividade ou expressão desregulada de RAB5A tem sido associada a alterações em programas de transporte intracelular observados na invasão de células tumorais, em fenótipos neurodegenerativos e em mecanismos de entrada de patógenos, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de tráfego de membranas e sinalização.
Rab 5A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAB5A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAB5A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAB5A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAB5A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.