Plasmide Double Nickase (h) R-Spondin3: sc-404472-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) R-Spondin3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide R-Spondin3 Double Nickase (h) et le plasmide R-Spondin3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RSPO3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) R-Spondin3 | sc-404472-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) R-Spondin3 | sc-404472-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RSPO3 code pour R-Spondin3, un agoniste sécrété de la signalisation Wnt canonique qui potentialise l’activité des récepteurs Frizzled/LRP en se liant à LGR4/5/6 et en modulant le renouvellement des récepteurs Wnt médié par RNF43/ZNRF3. Par cet axe, R-Spondin3 régule le maintien des cellules souches et progénitrices, le renouvellement épithélial, les programmes angiogéniques et la morphogenèse tissulaire. La signalisation dépendante de RSPO3 influence les réseaux transcriptionnels pilotés par la β-caténine qui orientent les décisions de destin cellulaire et les réponses prolifératives. Une expression dérégulée de RSPO3 ou l’engagement anormal de cette voie a été impliqué dans l’activité aberrante de la voie Wnt observée dans de multiples contextes pertinents pour les maladies, ce qui étaye son utilisation comme nœud mécanistique dans les études de voies de signalisation et de biologie du développement.
R-Spondin3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RSPO3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RSPO3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RSPO3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RSPO3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.