quiescin Q6CRISPR激活质粒(h): sc-405059-ACT

人类 QSOX1 基因编码 quiescin Q6，这是一种 FAD 依赖性的巯基氧化酶，能够催化二硫键形成，并参与分泌途径和细胞外基质中的氧化型蛋白质折叠。通过生成二硫键并以过氧化氢作为副产物，QSOX1 影响细胞氧化还原稳态、蛋白成熟以及基质重塑过程，从而调控细胞黏附与迁移。QSOX1 活性与肿瘤微环境结构变化、纤维化重塑以及炎症信号相关背景中的改变有关，使其成为研究疾病相关细胞外蛋白稳态（proteostasis）的一个重要节点。其表达与功能也与应激适应性通路相关，这些通路协同调控分泌、内质网/分泌转运以及氧化还原依赖性的信号传导。

quiescin Q6 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性QSOX1的表达。

quiescin Q6 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的QSOX1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于QSOX1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性quiescin Q6表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的QSOX1位点，并能够研究内源性位点上依赖于quiescin Q6的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在QSOX1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟quiescin Q6通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。