QIP1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-405442-NIC

KPNA4는 카리오페린 α 서브유닛 4(QIP1)를 암호화하며, 이는 고전적 핵 국소화 신호(NLS)를 인식하고 importin-β를 모집해 핵공복합체를 통한 단백질 이동을 매개하는 importin-α 계열 어댑터 단백질이다. KPNA4는 핵-세포질 간 수송을 조절함으로써 주요 전사인자와 조절 단백질의 핵 내 접근을 नियंत्र하고, 그 결과 전사 프로그램, 세포주기 진행, 스트레스 반응성 신호전달을 형성한다. KPNA4가 관여하는 핵 수입 동역학의 변화는 암 관련 맥락에서 증식 조절 이상, 침윤, 유전체 유지 경로의 교란과 연관되어 왔으며, DNA 손상 및 염증성 자극에 대한 세포 반응에도 영향을 줄 수 있다. 핵 수송의 중심 노드로서 KPNA4는 조절된 핵 국소화에 의존하는 경로의 연결 구조를 규명하기 위해 자주 분석 대상이 된다.

QIP1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 KPNA4 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 KPNA4 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 KPNA4의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, KPNA4 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.