PTPβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402100

Descripción general

PTPRB codifica la fosfatasa beta de tirosina proteína de tipo receptor (PTPβ), una fosfatasa enriquecida en el endotelio que contrarresta la señalización de las tirosina quinasas receptoras para modular el desarrollo vascular, la función de barrera y las respuestas angiogénicas. Al desfosforilar nodos de señalización vinculados a las vías de VEGF/FGF y a la remodelación de uniones celulares, PTPβ ayuda a ajustar la migración de las células endoteliales, la permeabilidad y la estabilización de los vasos. La actividad o expresión alterada de PTPRB se ha asociado con una angiogénesis y una homeostasis vascular desreguladas, lo que la hace relevante para estudios de fuga vascular asociada a la inflamación y de neovascularización asociada a tumores. Su papel regulador en la señalización dependiente de fosforilación también respalda investigaciones mecanísticas sobre la diferenciación endotelial y la formación de redes microvasculares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTPβ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPRB en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPRB junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPRB tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTPβ.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPRB para la investigación de la señalización de PTPβ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PTPRB críticos para la función de PTPβ
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPRB para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PTPβ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTPβ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPRB. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTPβ (h) y el plásmido HDR PTPβ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPRB para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPRB definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.