PRX III CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401730

概要

PRDX3はペルオキシレドキシンIII（PRX III）をコードしており、PRX IIIはミトコンドリアに局在するチオレドキシン依存性のペルオキシダーゼとして、過酸化水素および脂質ヒドロペルオキシドを解毒し、レドックス恒常性の維持に寄与します。PRX IIIはミトコンドリア由来の活性酸素種（ROS）を緩衝することで、酸化的リン酸化を支え、ミトコンドリアDNAやタンパク質への酸化損傷を抑制するとともに、レドックス感受性のシグナル伝達やアポトーシスにも影響を与えます。PRDX3の活性は、チオレドキシン2／チオレドキシンレダクターゼなどのミトコンドリア抗酸化システムと連携し、代謝ストレスや炎症ストレス下におけるミトコンドリアの完全性維持に寄与します。PRDX3の発現や機能の変化は酸化ストレス表現型と関連づけられており、ミトコンドリアのレドックス制御異常、細胞生存シグナル、代謝リプログラミングの関与が示唆される疾患の文脈で研究されています。

PRX III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPRDX3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PRDX3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PRDX3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRX IIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRX IIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PRDX3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRX IIIの機能に不可欠なPRDX3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PRDX3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRX III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPRX III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PRDX3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRX III HDRプラスミド（h）および PRX III HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPRDX3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPRDX3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。