Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PRPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404095
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRPS2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PRPS2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRPS2 Anticorpo (4C11): sc-134425
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404095 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PRPS2 (fosforribosil pirofosfato sintetase 2) é uma enzima citosólica que catalisa a síntese de 5-fosforribosil-1-pirofosfato (PRPP), um metabólito-chave necessário para a biossíntese de novo e de salvamento de nucleótidos de purina e pirimidina. Ao controlar a disponibilidade de PRPP, a PRPS2 liga o fluxo de fosfato de ribose à síntese de DNA/RNA, à sinalização dependente de nucleótidos e à proliferação celular, integrando sinais provenientes da glicólise e da via das pentoses fosfato. A desregulação do metabolismo de nucleótidos e da homeostase de PRPP está associada a alterações no controlo do crescimento e a reprogramação metabólica observadas em múltiplos contextos de doença, incluindo cancro e doenças hereditárias da via das purinas. Assim, a PRPS2 é amplamente estudada em mecanismos de stress de nucleótidos, dinâmica de replicação e vulnerabilidades metabólicas em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRPS2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PRPS2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PRPS2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PRPS2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRPS2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PRPS2 para a investigação da sinalização de PRPS2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PRPS2 críticos para a função PRPS2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PRPS2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PRPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PRPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PRPS2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PRPS2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PRPS2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PRPS2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PRPS2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.