PRP4 kinase Lentiviral Activation Particles (h2): sc-411224-LAC-2

ヒトPRPF4BはPRP4キナーゼをコードしており、U4/U6・U5トリsnRNPに会合するセリン／スレオニンプロテインキナーゼとして、スプライソソーム構成因子をリン酸化してスプライソソームの組み立てと触媒活性化を支え、pre-mRNAスプライシングを制御する。スプライス部位選択と転写産物の成熟を制御することを通じて、PRP4キナーゼは核内RNAプロセシングを、協調的な遺伝子発現に依存する細胞周期進行やストレス応答性シグナル伝達プログラムへと結び付ける。PRPF4Bの発現や活性の破綻は、がんをはじめRNAプロセシングが変化する他の疾患で観察される異常なスプライシングパターンと関連づけられており、トランスクリプトームの再構築やプロテオーム多様性の研究において重要である。ヒト細胞におけるPRPF4Bの遺伝子編集により、スプライソソーム動態、スプライシング因子のリン酸化制御、さらに選択的スプライシング、DNA損傷応答、および細胞表現型への下流影響を、機能ゲノミクスのワークフローで機構的に解析できる。

PRP4 kinase レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なPRPF4Bの発現上昇を可能にします。

PRP4 kinase レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、PRPF4B転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性PRP4 kinaseの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のPRPF4Bゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。