PRK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430934

概要

マウスPkn2は、プロテインキナーゼC関連キナーゼ2（PRK2）をコードする。PRK2はAGCファミリーに属するセリン/スレオニンキナーゼであり、Rho GTPaseのエフェクターとして機能して、細胞骨格の再構築とシグナル伝達を結び付ける。PRK2は、アクチン動態、フォーカルアドヒージョンのターンオーバー、細胞極性、ストレス応答性シグナルを制御する経路に関与し、さらに転写制御や細胞周期進行における役割も報告されている。RhoAおよび関連する足場タンパク質との相互作用を介して、PRK2は移動や形態形成プログラムに影響を及ぼし、これらは発生生物学やがん生物学でしばしば解析対象となる。PRK2関連シグナルの破綻は、モデル系において増殖性や浸潤性の表現型変化と関連付けられており、疾患関連の細胞状態の機序研究における重要性を支持している。

PRK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPkn2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Pkn2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Pkn2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRK2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRK2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Pkn2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRK2の機能に不可欠なPkn2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Pkn2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPRK2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Pkn2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRK2 HDRプラスミド（m）および PRK2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPkn2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPkn2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。