prefoldin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423658

概要

Vbp1 は prefoldin 3 をコードしており、prefoldin 様機構を構成する共シャペロン因子の一つです。この機構は、特定のクライアントタンパク質の折りたたみと安定化を補助することで、細胞質におけるタンパク質恒常性（プロテインホメオスタシス）を支えます。Prefoldin 3 は、細胞骨格の組織化、高分子複合体の組み立て、ならびに細胞ストレス下でのタンパク質ミスフォールディングを抑制するシャペロン経路との連携に関わるプロテオスタシス・ネットワークに寄与します。これらの過程を通じて、Vbp1 の活性は細胞周期の進行、ストレス適応、そしてタンパク質の折りたたみと分解のバランスに影響し得ます。シャペロン関連経路の制御異常は、タンパク質毒性ストレスや神経変性のモデルにおいて重要であり、折りたたみ能や品質管理の変化が疾患関連の表現型を修飾し得ます。

prefoldin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるVbp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Vbp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Vbp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、prefoldin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、prefoldin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Vbp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• prefoldin 3の機能に不可欠なVbp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Vbp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• prefoldin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびprefoldin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Vbp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  prefoldin 3 HDRプラスミド（m）および prefoldin 3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVbp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVbp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。