PRDM9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412740-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRDM9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PRDM9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PRDM9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRDM9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRDM9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412740-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRDM9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412740-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM9 codifica uma metiltransferase de lisina em histonas específica da meiose e um fator de ligação ao DNA que define a localização de hotspots de recombinação ao reconhecer motivos de sequência e depositar as marcas H3K4me3 e H3K36me3. Por meio de seus domínios KRAB, PR/SET e de dedos de zinco, PRDM9 coordena a remodelação da cromatina e o recrutamento da maquinaria de recombinação meiótica para iniciar a formação programada de quebras de dupla fita e o pareamento adequado de cromossomos homólogos. A variação nos arranjos de dedos de zinco de PRDM9 é um determinante importante do uso de hotspots e da distribuição de crossovers, conectando a função de PRDM9 à estabilidade do genoma e à biologia reprodutiva. A atividade desregulada de PRDM9 ou sua expressão ectópica também têm sido exploradas no contexto de padrões epigenéticos aberrantes e rearranjos genômicos, tornando-a relevante para estudos de processos mutacionais e da integridade da linhagem germinativa.
PRDM9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRDM9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRDM9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRDM9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRDM9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.