POLDIP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413603

Descripción general

POLDIP3 (proteína 3 que interactúa con la polimerasa delta), también conocida como SKAR, es una proteína de unión a ARN que acopla el empalme (splicing) del ARNm con la traducción y favorece la síntesis eficiente de proteínas necesarias para el crecimiento celular. Actúa aguas abajo de la señalización de mTOR, donde interacciones dependientes de fosforilación ayudan a coordinar el inicio de la traducción y el reclutamiento de ribosomas hacia transcritos empalmados. POLDIP3 también se ha asociado con la regulación de vías de mantenimiento del genoma mediante interacciones con complejos de polimerasas de ADN, integrando señales proliferativas con procesos asociados a la replicación. La desregulación de estas redes de procesamiento de ARN y control del crecimiento es relevante para estudios de transformación maligna, respuestas celulares al estrés y trastornos proliferativos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO POLDIP3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen POLDIP3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del POLDIP3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de POLDIP3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína POLDIP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en POLDIP3 para la investigación de la señalización de POLDIP3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de POLDIP3 críticos para la función de POLDIP3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de POLDIP3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido POLDIP3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido POLDIP3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus POLDIP3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR POLDIP3 (h) y el plásmido HDR POLDIP3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología POLDIP3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana POLDIP3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.