Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
plexin-B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431226
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- plexin-B2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico plexin-B2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:plexin-B2 Anticorpo (A-5): sc-373969
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
plexin-B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-431226 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Plxnb2 codifica a plexina-B2, um recetor transmembranar para semaforinas da classe 4 que integra sinais de orientação com a remodelação do citoesqueleto e a motilidade celular. A sinalização da plexina-B2 influencia a atividade das GTPases da família Rho e interage com vias de recetores tirosina-quinase para coordenar a adesão, a migração e a morfogénese durante o desenvolvimento neural e a organização dos tecidos. Em sistemas murinos, a função de Plxnb2 é frequentemente estudada na orientação axonal, na ramificação epitelial e na regulação das interações célula–célula em tecidos em desenvolvimento e adultos. A desregulação da sinalização semaforina–plexina tem sido associada a fenótipos anómalos de migração e invasão em contextos relevantes para doenças, sustentando a sua utilidade como um nó mecanístico em vias que controlam a arquitetura tecidular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO plexin-B2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Plxnb2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Plxnb2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Plxnb2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína plexin-B2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Plxnb2 para a investigação da sinalização de plexin-B2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Plxnb2 críticos para a função plexin-B2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Plxnb2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo plexin-B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo plexin-B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Plxnb2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo plexin-B2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR plexin-B2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Plxnb2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Plxnb2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.