PKC lambda/iota Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402111-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PKC lambda/iotaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PKC lambda/iota (h) e o Plasmídeo Double Nickase PKC lambda/iota (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRKCI. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PKC lambda/iota Anticorpo (E-7): sc-376344
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PKC lambda/iota Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402111-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PKC lambda/iota Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402111-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRKCI codifica a isoforma atípica da proteína quinase C PKC lambda/iota (PKCι), uma quinase de serina/treonina que atua como componente central do complexo de polaridade PAR juntamente com PAR3 e PAR6. A PKC lambda/iota integra sinais de GTPases da família Rho e de vias de fatores de crescimento para regular a polaridade ápico-basal, a montagem de junções estreitas, a divisão celular assimétrica e a migração direcional. Por meio da fosforilação de substratos de polaridade e de tráfego intracelular, influencia a remodelação do citoesqueleto e a dinâmica de vesículas que moldam a organização epitelial. A desregulação da sinalização de PRKCI/PKC lambda/iota tem sido associada a polaridade alterada e comportamento invasivo em múltiplos contextos tumorais, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos de sinalização oncogênica e arquitetura tecidual.
PKC lambda/iota O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRKCI em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRKCI. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRKCI. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRKCI interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.