Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PKAα cat Antibody (A-2): sc-28315. Western blot analysis of PKAα cat expression in PC-3 (A), IMR-32 (B), C6 (C) and AT3B-1 (D) whole cell lysates and human testis tissue extract (E).
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PKAα cat双切口酶质粒(h): sc-400262-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PKAα cat 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PKAα cat双切酶质粒（h）和PKAα cat双切酶质粒（h2）编码针对PRKACA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PKAα cat: sc-28315，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PKAα cat双切口酶质粒(h) | sc-400262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PKAα cat双切口酶质粒(h2) | sc-400262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRKACA 编码 cAMP 依赖性蛋白激酶 A（PKAα）的催化亚基 α，是 GPCR–腺苷酸环化酶信号通路的核心效应分子，可对多种底物进行磷酸化，从而调控代谢、离子通道活性、转录以及细胞周期进程。PKAα 调节 CREB 依赖的基因表达，并与 MAPK、钙信号及 AKT 通路等节点相互整合，塑造情境特异性的细胞反应。PRKACA 活性异常与 cAMP 信号失衡相关，并被认为参与内分泌及肝脏肿瘤生物学、肾上腺功能亢进以及分化程序改变等过程。作为 cAMP/PKA 轴中的关键激酶，PRKACA 被广泛用于信号转导、应激反应及磷酸化蛋白质组网络图谱绘制等研究。
PKAα cat 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PRKACA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PRKACA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PRKACA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PRKACA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。