PIMT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407101

개요

인간 TGS1 유전자는 트라이메틸구아노신 합성효소 1(PIMT)을 암호화하며, 이는 SAM 의존적 메틸전이효소로서 snRNA 및 기타 소형 핵 RNA의 2,2,7-트라이메틸구아노신(TMG) 캡을 형성(전환)합니다. 이러한 변형은 snRNP의 성숙, 핵 내 유입, 그리고 스플라이소솜 기능을 지원하여, TGS1 활성이 pre-mRNA 스플라이싱의 정확성과 더 광범위한 RNA 처리 네트워크와 연결되도록 합니다. 또한 TGS1은 단백질 항상성(proteostasis)과 스트레스 반응에 영향을 미치는 RNA 품질 관리 및 리보핵단백질 생합성 경로와도 연계됩니다. RNA 대사 이상과 스플라이싱 관련 프로그램의 교란은 TGS1/PIMT가 신경퇴행, 암 생물학, 발달 관련 표현형과 연관된 기전에 관여할 가능성을 시사하며, 따라서 경로 중심 연구에서 유용한 노드가 됩니다.

PIMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TGS1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TGS1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TGS1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PIMT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PIMT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TGS1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PIMT 기능에 중요한 TGS1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TGS1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PIMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PIMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TGS1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PIMT HDR 플라스미드 (h) 및 PIMT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TGS1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TGS1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.