Phox2b CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401351

개요

PHOX2B는 자율신경계 발달과 노르아드레날린성 뉴런 분화를 조율하는 paired-like homeobox 전사인자인 Phox2b를 암호화하며, 신경능선 및 후뇌 패터닝 과정에서 유전자 발현 프로그램을 제어함으로써 이러한 과정을 이끕니다. Phox2b는 카테콜아민 생합성, 뉴런 계통 지정과 성숙에 관여하는 전사 네트워크를 조절하고, 신경 전구세포의 운명 결정과 말초신경계 계통 분화를 형성하는 신호 경로들과 상호작용합니다. PHOX2B 기능의 이상은 선천성 중추성 저환기 증후군을 포함한 신경능선병(neurocristopathies) 및 신경모세포종과 같은 신경능선 유래 발달성 종양과 강하게 연관되는데, 이는 PHOX2B가 자율신경계 뉴런 정체성의 확립과 유지에 핵심적 역할을 하기 때문입니다. 계통을 규정하는 조절 인자로서 PHOX2B는 신경발달에서의 전사 조절, 그리고 세포 상태의 안정성과 재프로그래밍 메커니즘을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 활용됩니다.

Phox2b CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PHOX2B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PHOX2B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PHOX2B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Phox2b 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Phox2b 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PHOX2B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Phox2b 기능에 중요한 PHOX2B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PHOX2B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Phox2b CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Phox2b CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PHOX2B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Phox2b HDR 플라스미드 (h) 및 Phox2b HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PHOX2B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PHOX2B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.