PFKFB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404532
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PFKFB3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PFKFB3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PFKFB3 Anticorpo (3F3): sc-293477
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PFKFB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404532 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PFKFB3 codifica a 6-fosfofructo-2-quinase/frutose-2,6-bisfosfatase 3, uma enzima bifuncional que controla os níveis intracelulares de frutose-2,6-bisfosfato para modular a atividade da fosfofrutoquinase-1 e o fluxo glicolítico. Em células humanas, a PFKFB3 sustenta a glicólise em alta taxa e coordena a adaptação metabólica a sinais de fatores de crescimento, à disponibilidade de nutrientes e a respostas ao estresse, conectando o metabolismo de carboidratos à progressão do ciclo celular e à demanda biossintética. Sua atividade se cruza com programas associados à hipóxia e a oncogenes e tem sido estudada em contextos nos quais a reprogramação metabólica influencia proliferação, migração e sinalização inflamatória. Expressão desregulada de PFKFB3 e alterações no controle glicolítico foram relatadas em múltiplos modelos relevantes para doenças, incluindo metabolismo do câncer e ativação de células vasculares ou do sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PFKFB3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PFKFB3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PFKFB3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PFKFB3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PFKFB3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PFKFB3 para a investigação da sinalização de PFKFB3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PFKFB3 críticos para a função PFKFB3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PFKFB3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PFKFB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PFKFB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PFKFB3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PFKFB3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PFKFB3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PFKFB3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PFKFB3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.