非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PERK慢病毒激活颗粒(h): sc-400080-LAC
- 针对种属：human
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- PERK 慢病毒激活颗粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- PERK慢病毒激活颗粒(h)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 PERK 慢病毒激活质粒 (h) 和 PERK 慢病毒激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 靶向 EIF2AK3 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：PERK Antibody (B-5): sc-377400，通过WB、IF或IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PERK慢病毒激活颗粒(h) | sc-400080-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 EIF2AK3 基因编码 PERK，这是一种定位于内质网的跨膜激酶，在未折叠蛋白反应（UPR）中充当内质网应激的主要感受器。PERK 被激活后会磷酸化 eIF2α，从而抑制全局蛋白翻译，同时促进 ATF4 等应激响应转录本的选择性翻译，进而协同调控氧化还原平衡、氨基酸代谢与自噬程序。PERK 信号还与蛋白质稳态、线粒体功能及炎症通路发生交互作用，在持续应激条件下影响细胞在适应与凋亡之间的命运抉择。EIF2AK3/PERK 活性失衡与多种以慢性内质网应激为特征的疾病相关，包括神经退行性病变、代谢功能障碍以及肿瘤微环境适应，因此它是开展应激信号机制研究的重要枢纽节点。
PERK 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 EIF2AK3 表达。
PERK 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在EIF2AK3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PERK表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 EIF2AK3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。