Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PERK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400080-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PERKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PERK (h) e o Plasmídeo Double Nickase PERK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF2AK3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PERK Anticorpo (B-5): sc-377400
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PERK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400080-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PERK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400080-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2AK3 codifica a PERK, uma quinase transmembrana residente no retículo endoplasmático (RE) que detecta o acúmulo de proteínas mal dobradas e inicia a resposta a proteínas mal dobradas (UPR). Quando ativada, a PERK fosforila a eIF2α para atenuar a tradução global, ao mesmo tempo que promove programas de tradução seletiva, coordenando assim a proteostase, o controle do estresse oxidativo e adaptações relacionadas à autofagia. A sinalização da PERK cruza-se com saídas transcricionais mediadas por ATF4/CHOP e influencia a comunicação entre RE e mitocôndrias e a homeostase redox. A atividade desregulada da PERK tem sido associada a estados crônicos de estresse do RE implicados em neurodegeneração, disfunção metabólica e adaptação de células tumorais ao estresse, tornando-a um nó-chave para estudos mecanísticos de sinalização de estresse.
PERK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF2AK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF2AK3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF2AK3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF2AK3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.