非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PCMT1 抗体（D-E7）：sc-100977。Western blot 分析未处理的 HeLa（A）、化学处理的 HeLa（B）、K-562（C）、未处理的 HCT-116（D）和化学处理的 HCT-116（E）全细胞裂解液中 PCMT1 的表达。β-肌动蛋白（C4）：sc-47778用作内参。检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP：sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PCMT1双切口酶质粒(h): sc-418153-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PCMT1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PCMT1双切酶质粒（h）和PCMT1双切酶质粒（h2）编码针对PCMT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PCMT1: sc-100977，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PCMT1双切口酶质粒(h) | sc-418153-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PCMT1双切口酶质粒(h2) | sc-418153-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PCMT1 编码蛋白-L-异天冬氨酸（D-天冬氨酸）O-甲基转移酶 1，这是一种依赖 SAM 的修复酶，可对由天冬酰胺和天冬氨酸自发脱酰胺或异构化产生的异常异天冬氨酸残基进行甲基化。该蛋白质质量控制活性通过促进受损残基向正常天冬氨酸形式恢复，并限制与年龄相关的功能失常蛋白累积，从而支持蛋白质稳态（proteostasis）。PCMT1 的功能与细胞应激反应、蛋白质周转，以及在氧化与代谢应激下维持酶类和细胞骨架蛋白的完整性相互交织。PCMT1 活性改变已被认为与神经元易损性及与蛋白损伤相关的表型有关，因此对神经生物学、衰老以及应激适应机制的研究具有意义。
PCMT1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PCMT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PCMT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PCMT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PCMT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。