Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PCCB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426258
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PCCB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PCCB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PCCB Anticorpo (F-6): sc-515740
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PCCB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426258 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Pccb do camundongo codifica a subunidade beta da propionil‑CoA carboxilase (PCCB), uma enzima mitocondrial dependente de biotina que catalisa a conversão de propionil‑CoA em metilmalonil‑CoA. Essa reação conecta o catabolismo de aminoácidos de cadeia ramificada (valina, isoleucina), de ácidos graxos de cadeia ímpar e da cadeia lateral do colesterol ao aporte anaplerótico no ciclo do TCA (ciclo do ácido cítrico) via succinil‑CoA. A função de PCCB sustenta o metabolismo mitocondrial e a homeostase energética celular ao evitar o acúmulo de metabólitos derivados de propionil‑CoA. A interrupção da atividade da propionil‑CoA carboxilase está associada à biologia da acidemia propiônica, tornando Pccb um locus útil para estudar respostas ao estresse metabólico e adaptação de vias mitocondriais em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PCCB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pccb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pccb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pccb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PCCB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pccb para a investigação da sinalização de PCCB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pccb críticos para a função PCCB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pccb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PCCB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PCCB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pccb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PCCB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PCCB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pccb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pccb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.