PCB CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401254

개요

인간 PC(피루브산 카복실화효소, pyruvate carboxylase) 유전자는 비오틴 의존성 미토콘드리아 효소를 암호화하며, ATP에 의해 구동되는 피루브산의 카복실화를 통해 옥살로아세트산으로 전환하는 반응을 촉매합니다. 이는 삼카복실산(TCA) 회로 중간체를 보충하여 아니플레로시스(anaplerosis)를 지원합니다. PC 활성은 중심 탄소 대사를 포도당신생합성, 지질생합성, 아미노산 생합성과 연결하며, 미토콘드리아 산화환원 균형과 세포 에너지 항상성에도 영향을 미칩니다. PC의 발현 또는 기능 변화는 선천성 대사 이상과 연관되어 왔고, 암 및 간 질환을 포함한 여러 질환 맥락에서 관찰되는 대사 재프로그래밍과도 관련이 있으며, 이때 아니플레로틱 플럭스는 증식과 스트레스 반응에 영향을 줄 수 있습니다.

PCB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PC 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PC 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PC의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PCB 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PCB 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PC 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PCB 기능에 중요한 PC 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PC 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PCB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PCB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PC 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PCB HDR 플라스미드 (h) 및 PCB HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PC 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PC 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.