PBR Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-419383-ACT
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PBRO plasmídeo de ativação de CRISPR (m)e um mediador da ativação sinergética (SAM) dentro do sistema de ativada da transcrição, criado para a especificamente fazer a regulação genética crescente
- PBR Plasmídeo de ativação CRISPR (m) consiste em 3 pares de plasmídeos com a razão de massa de 1:1:1: um plasmídeo contento o código para Cas9 desativada
- O complexo SAM resultante se liga a uma região especifica a qual contem aproximadamente 200-250 nt na região upstream da região de inicio da transcrição e fornece um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética.
- Os gRNAs codificados pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR PBR (m) e pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR PBR (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas a montante do local de início da transcrição de Tspo. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PBR Plasmídeo de ativação de CRISPR (m) | sc-419383-ACT | 20 µg | $397.00 |
O gene Tspo de camundongo codifica o receptor periférico de benzodiazepínicos (PBR), uma proteína translocadora de 18 kDa localizada principalmente na membrana externa mitocondrial. O PBR contribui para o transporte mitocondrial de colesterol e para a esteroidogênese, além de modular a biossíntese de heme, o metabolismo de porfirinas, a suscetibilidade à apoptose e a sinalização por espécies reativas de oxigênio. Por seu papel na homeostase mitocondrial e nas respostas imunes gliais, o TSPO/PBR é amplamente estudado em neuroinflamação, disfunção mitocondrial e remodelamento metabólico responsivo ao estresse, relevantes para modelos de doenças neurodegenerativas e psiquiátricas.
PBR O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Tspo sem alterar a sequência de ADN subjacente.
PBR O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Tspo em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Tspo, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de PBR. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Tspo nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de PBR no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via PBR em células tumorais com expressão de Tspo silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.