PARP-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-437160

Descripción general

Parp10 codifica PARP-10, una mono-ADP-ribosiltransferasa que regula la función de las proteínas mediante ADP-ribosilación, influyendo en la estabilidad proteica, la localización subcelular y las salidas de señalización. PARP-10 se ha vinculado al control de las respuestas al daño del ADN, la tolerancia al estrés replicativo y procesos asociados a la cromatina, integrándose con la regulación proteica dependiente de ubiquitina y otras redes de modificaciones postraduccionales. En sistemas de ratón, la actividad de PARP-10 se investiga comúnmente en el contexto del mantenimiento del genoma, la progresión del ciclo celular y la señalización adaptativa al estrés que configura la homeostasis celular. La desregulación de las vías de ADP-ribosilación se asocia de forma general con proliferación aberrante y señalización inflamatoria, lo que convierte a Parp10 en un nodo útil para estudios mecanísticos de la interconexión entre vías en modelos relevantes para enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PARP-10 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Parp10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Parp10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Parp10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PARP-10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Parp10 para la investigación de la señalización de PARP-10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Parp10 críticos para la función de PARP-10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Parp10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PARP-10 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PARP-10 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Parp10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PARP-10 (m) y el plásmido HDR PARP-10 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Parp10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Parp10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.