PARP-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-437160

Visão geral

Parp10 codifica a PARP-10, uma mono-ADP-ribosiltransferase que regula a função de proteínas por meio da ADP-ribosilação, influenciando a estabilidade proteica, a localização subcelular e as respostas de sinalização. A PARP-10 tem sido associada ao controle de respostas a danos no DNA, à tolerância ao estresse de replicação e a processos ligados à cromatina, integrando-se à regulação proteica dependente de ubiquitina e a outras redes de modificações pós-traducionais. Em sistemas murinos, a atividade da PARP-10 é comumente investigada no contexto da manutenção do genoma, da progressão do ciclo celular e da sinalização adaptativa ao estresse que molda a homeostase celular. A desregulação das vias de ADP-ribosilação está amplamente associada à proliferação anômala e à sinalização inflamatória, tornando Parp10 um alvo útil para estudos mecanísticos de interação entre vias em modelos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PARP-10 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Parp10 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Parp10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Parp10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PARP-10.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Parp10 para a investigação da sinalização de PARP-10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Parp10 críticos para a função PARP-10
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Parp10 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PARP-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PARP-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Parp10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PARP-10 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PARP-10 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Parp10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Parp10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.