PARG Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404382-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PARGO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PARG (h) e o Plasmídeo Double Nickase PARG (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PARG. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PARG Anticorpo (H-1): sc-398563
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PARG Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404382-NIC | 20 µg | $410.00 |
A poli(ADP-ribose) glico-hidrolase (PARG) é a principal enzima que hidrolisa as cadeias de poli(ADP-ribose) (PAR), contrapondo-se à PARilação dependente de PARP durante a resposta a danos no DNA. Ao controlar o turnover de PAR, a PARG molda a dinâmica da cromatina, as respostas ao estresse replicativo e a resolução de complexos de sinalização dependentes de PAR que se formam em lesões de DNA. A atividade da PARG cruza-se com vias que regulam o reparo de quebras de fita simples, a estabilidade das forquilhas de replicação e a integridade do genoma, e alterações no metabolismo de PAR têm sido associadas a fenótipos de reparo de DNA ligados a tumores e a respostas ao estresse relevantes para a neurodegeneração. Como regulador central da homeostase da PARilação, a PARG é amplamente utilizada como um nó para dissecar a arquitetura da via PARP–PARG e os mecanismos de recrutamento de proteínas mediado por PAR.
PARG O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PARG em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PARG. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PARG. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PARG interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.