Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PAP-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403907
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAP-β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PAP-β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAP-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403907 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PAPOLB codifica a poli(A) polimerase beta (PAP-β), uma enzima de poliadenilação não canónica com expressão enriquecida em células germinativas masculinas, que dá suporte ao controlo pós-transcricional durante a espermatogénese. Ao alongar as caudas poli(A) de mRNAs selecionados, a PAP-β influencia a estabilidade dos transcritos, a exportação nuclear e a ativação da tradução, integrando-se em redes mais amplas de processamento de RNA e de vigilância de mRNA. Alterações na atividade de PAPOLB têm sido associadas a defeitos no desenvolvimento dos espermatozoides e a fenótipos de fertilidade diminuída, tornando-o relevante para estudos de regulação génica na linhagem germinativa. O PAPOLB também constitui um modelo para dissecar como poli(A) polimerases especializadas moldam programas de expressão génica específicos de cada fase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAP-β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAPOLB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAPOLB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAPOLB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAP-β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAPOLB para a investigação da sinalização de PAP-β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAPOLB críticos para a função PAP-β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAPOLB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PAP-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PAP-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAPOLB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PAP-β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PAP-β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAPOLB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAPOLB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.