Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Paf1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417797
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Paf1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Paf1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Paf1 Anticorpo (E-7): sc-514491
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Paf1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417797 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PAF1 codifica a Paf1, uma subunidade central do complexo fator associado à RNA polimerase II 1 (PAF1C), que coordena o alongamento da transcrição com o processamento de RNA co-transcricional e a regulação da cromatina. Por meio de interações com a Pol II e com a maquinaria de alongamento, o PAF1C influencia a pausa proximal ao promotor, a formação da extremidade 3′ do mRNA e a deposição de marcas de histonas ligadas à transcrição ativa, incluindo a metilação de H3K4 e H3K36. A Paf1 contribui para a estabilidade do genoma ao modular conflitos entre transcrição e replicação e respostas a danos no DNA, e participa do controle do ciclo celular e de programas de diferenciação. A atividade desregulada do PAF1C e a expressão alterada de PAF1 têm sido associadas a programas transcricionais aberrantes observados em múltiplos cânceres e outras doenças que envolvem desregulação epigenética e transcricional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Paf1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Paf1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAF1 para a investigação da sinalização de Paf1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAF1 críticos para a função Paf1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAF1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Paf1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Paf1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Paf1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Paf1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.