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p38 alpha MAPK14双切口酶质粒(m) | sc-424051-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p38 alpha MAPK14双切口酶质粒(m2) | sc-424051-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Mapk14 编码 p38α(MAPK14),这是一种应激激活的丝氨酸/苏氨酸激酶,可整合炎性细胞因子、氧化应激及环境刺激,从而塑造细胞反应。p38α 参与 MAPK 信号级联,调控磷酸化程序;并通过 MAPKAPK2/3 等下游靶点以及 ATF2、CREB 等转录因子,控制转录、mRNA 稳定性、凋亡、分化和细胞周期检查点。在免疫细胞与基质细胞等细胞区室中,MAPK14 促进细胞因子产生和先天免疫信号传导,将细胞应激反应与组织稳态联系起来。p38α 活性失衡与炎症相关病理生理、神经炎症过程以及肿瘤微环境生物学有关,因此常被用于多种小鼠疾病模型的机制研究。
p38 alpha MAPK14 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Mapk14 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mapk14内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Mapk14的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Mapk14基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。