P2Y12 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427818-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2Y12O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P2Y12 (m) e o Plasmídeo Double Nickase P2Y12 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2ry12. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2Y12 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427818-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
P2Y12 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427818-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **P2ry12** codifica o receptor purinérgico **P2Y12**, um GPCR acoplado à proteína Gi que detecta ADP extracelular para suprimir a sinalização de cAMP e coordenar respostas a jusante das vias **PI3K–Akt** e **MAPK**. No sistema nervoso central, o P2Y12 é altamente enriquecido em micróglia, onde regula a motilidade dos prolongamentos, a quimiotaxia e os comportamentos de vigilância em resposta a sinais purinérgicos liberados por células estressadas ou danificadas. A sinalização dependente de P2Y12 influencia a comunicação neuroimune, a remodelação sináptica e o tônus inflamatório, tornando **P2ry12** um marcador molecular amplamente utilizado e um nó funcional na biologia da micróglia. A desregulação da sinalização purinérgica via P2Y12 tem sido associada a estados alterados de ativação microglial em modelos de neuroinflamação e neurodegeneração.
P2Y12 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2ry12 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2ry12. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2ry12. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2ry12 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.