Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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P2X4 Plasmide Double Nickase (h): sc-401779-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- P2X4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il P2X4 Double Nickase Plasmid (h) e il P2X4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira P2RX4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: P2X4 Antibody (D-3): sc-518167
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
P2X4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401779-NIC | 20 µg | $410.00 |
P2RX4 codifica il recettore umano P2X4, un canale cationico non selettivo attivato dall’ATP che media un rapido ingresso di Ca²⁺ e Na⁺ in risposta ai nucleotidi extracellulari. La segnalazione di P2X4 contribuisce alla neurotrasmissione purinergica, all’attivazione della microglia e al crosstalk infiammatorio, integrandosi con vie che regolano il rilascio di citochine, la chemiotassi e l’eccitabilità cellulare. In contesti immunitari e del sistema nervoso, l’attività di P2X4 è collegata a meccanismi alla base della neuroinfiammazione e del dolore neuropatico, ed è stata studiata in relazione a risposte allo stress vascolare e metabolico. In quanto canale ionico di membrana sensibile all’ATP associato al danno, P2X4 rappresenta un nodo utile per indagare la segnalazione guidata dall’ATP e i programmi trascrizionali dipendenti dai flussi ionici.
P2X4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus P2RX4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di P2RX4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di P2RX4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con P2RX4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.