p22HBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420826

概要

マウスHebp1は、細胞内のヘム輸送およびヘム依存的なレドックス制御に関与するとされるヘム結合タンパク質p22HBPをコードします。p22HBPはミトコンドリア関連プロセス、酸化ストレス応答、ならびにアポトーシスの調節との関連が報告されており、代謝ストレス下での細胞恒常性維持における役割と整合的です。ヘムおよびヘム由来のシグナルとの相互作用を介して、Hebp1は活性酸素種（ROS）バランス、ミトコンドリア機能、タンパク質品質管理に関わる経路に影響を及ぼす可能性があります。ヘム取り扱いの破綻や酸化障害は神経変性や炎症性組織障害と関連するため、Hebp1はこれらの文脈における機序解明研究の有用な標的となります。

p22HBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるHebp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Hebp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Hebp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、p22HBPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、p22HBPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Hebp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• p22HBPの機能に不可欠なHebp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Hebp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• p22HBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびp22HBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Hebp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  p22HBP HDRプラスミド（m）および p22HBP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHebp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHebp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。