
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
OTUB1双切口酶质粒(h) | sc-407665-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OTUB1双切口酶质粒(h2) | sc-407665-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OTUB1(OTU 去泛素化酶,泛素醛结合蛋白 1)是一种半胱氨酸蛋白酶型去泛素化酶,优先切割 K48 连接的泛素链,并且还可抑制 E2 泛素连接酶,从而塑造泛素信号传导的输出。通过这些作用,OTUB1 调控蛋白稳定性以及信号动态变化,参与控制 DNA 损伤应答、细胞周期进程和应激信号等通路,包括对 p53 通路组分以及与修复相关的泛素化事件的调节。OTUB1 依赖的对泛素依赖性蛋白稳态(proteostasis)的精细调控,会影响免疫与炎症信号的关键节点,并可改变重要调控蛋白的周转。已有报道显示,在多种癌症情境及其他泛素稳态与基因组维护受扰的疾病中,OTUB1 的表达或活性出现失调,这也支持其作为通路机制研究中一个有价值的靶点。
OTUB1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 OTUB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对OTUB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏OTUB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了OTUB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。