Date published: 2026-7-11

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OTUB1双切口酶质粒(h): sc-407665-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • OTUB1 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • OTUB1双切酶质粒(h)和OTUB1双切酶质粒(h2)编码针对OTUB1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:OTUB1: sc-130458,通过WB, IF或者IHC分析
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    OTUB1双切口酶质粒(h)

    sc-407665-NIC
    20 µg
    $410.00

    OTUB1双切口酶质粒(h2)

    sc-407665-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    OTUB1(OTU 去泛素化酶,泛素醛结合蛋白 1)是一种半胱氨酸蛋白酶型去泛素化酶,优先切割 K48 连接的泛素链,并且还可抑制 E2 泛素连接酶,从而塑造泛素信号传导的输出。通过这些作用,OTUB1 调控蛋白稳定性以及信号动态变化,参与控制 DNA 损伤应答、细胞周期进程和应激信号等通路,包括对 p53 通路组分以及与修复相关的泛素化事件的调节。OTUB1 依赖的对泛素依赖性蛋白稳态(proteostasis)的精细调控,会影响免疫与炎症信号的关键节点,并可改变重要调控蛋白的周转。已有报道显示,在多种癌症情境及其他泛素稳态与基因组维护受扰的疾病中,OTUB1 的表达或活性出现失调,这也支持其作为通路机制研究中一个有价值的靶点。

    OTUB1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 OTUB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对OTUB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏OTUB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了OTUB1基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。