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Optineurin双切口酶质粒(h) | sc-401851-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Optineurin双切口酶质粒(h2) | sc-401851-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OPTN 编码 optineurin(视神经蛋白),这是一种能结合泛素的衔接蛋白,整合选择性自噬、囊泡运输以及先天免疫信号传导。Optineurin 在抗菌自噬(xenophagy)和线粒体自噬(mitophagy)过程中作为自噬受体发挥作用,通过将被泛素化的货物连接到 LC3 家族蛋白上,并调控 NF-κB 以及依赖 TBK1/IRF3 的抗病毒通路。它还通过与肌球蛋白 VI、Rab 小 GTP 酶和泛素链复合体相互作用,参与高尔基体维持和膜动力学。OPTN 的失调或突变与神经退行性变和青光眼相关表型有关,因此它是蛋白质稳态与炎症信号网络中被广泛研究的关键节点。
Optineurin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 OPTN 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对OPTN内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏OPTN的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了OPTN基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。