OB-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401051
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- OB-cadherin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico OB-cadherin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:OB-cadherin Anticorpo (F-3): sc-365867
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
OB-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401051 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDH11 codifica a OB-caderina, uma caderina clássica que medeia a adesão homofílica célula–célula dependente de cálcio e contribui para a arquitetura tecidual e a sinalização intercelular. Por meio de interações com cateninas, a OB-caderina conecta as junções aderentes ao citoesqueleto de actina e influencia vias que regulam a polaridade celular, a migração e a mecanotransdução, incluindo a regulação da disponibilidade de β-catenina e o remodelamento das junções. O CDH11 é fortemente expresso em linhagens mesenquimais e em compartimentos estromais, onde sustenta a organização da matriz extracelular e programas de motilidade celular. A expressão desregulada de CDH11 tem sido associada ao remodelamento fibrótico, à patologia inflamatória articular e a interações tumor–estroma relevantes para a invasão e a formação de nichos metastáticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OB-cadherin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDH11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDH11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDH11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OB-cadherin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDH11 para a investigação da sinalização de OB-cadherin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDH11 críticos para a função OB-cadherin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDH11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo OB-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OB-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDH11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo OB-cadherin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OB-cadherin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDH11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDH11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.