Plásmido Doble Nickase (m) NUDT8: sc-425987-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)NUDT8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NUDT8 (m) y el plásmido de doble nickasa NUDT8 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Nudt8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) NUDT8 | sc-425987-NIC | 20 µg | $410.00 |
Nudt8 codifica NUDT8, un miembro de la familia de hidrolasas Nudix implicado en la “depuración” del reservorio celular de nucleótidos mediante la hidrólisis de derivados de difosfato de nucleótidos potencialmente mutagénicos o con actividad de señalización. Al regular la abundancia de nucleótidos oxidados o no canónicos, NUDT8 puede influir en la fidelidad de la replicación del ADN, en las respuestas al estrés asociadas al estado redox y en vías del metabolismo de nucleótidos que convergen con la homeostasis mitocondrial y peroxisomal. La desregulación de esta depuración de nucleótidos es, en términos generales, relevante para la inestabilidad genómica y fenotipos de estrés inflamatorio, lo que convierte a Nudt8 en un objetivo útil para investigar mecanismos que acoplan el estado metabólico con la susceptibilidad al daño del ADN. Los estudios de Nudt8 en ratón pueden ayudar a aclarar funciones específicas por tejido de las enzimas Nudix en el manejo del estrés oxidativo y el control de calidad de los ácidos nucleicos.
NUDT8 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Nudt8 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Nudt8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Nudt8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Nudt8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.