NPY5-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421954

概要

Npy5rは、ニューロペプチドY受容体Y5（NPY5-R）をコードしている。NPY5-RはGi/o共役型のGPCRで、ニューロペプチドYおよび関連ペプチドに結合し、細胞内cAMP濃度や下流のキナーゼシグナル伝達を調節する。中枢神経系においてNPY5-Rは、視床下部および辺縁系回路の統合を介して、摂食行動、エネルギー恒常性、ストレス応答性、ならびに神経内分泌出力の制御に寄与する。受容体の活性化は、シナプス伝達、神経細胞の興奮性、神経ペプチド作動性ネットワークの可塑性に影響し、Npy5rを食欲および代謝調節を司る経路と結び付けている。NPYシグナルの異常は、肥満関連の表現型や情動・ストレス過程と関連づけられており、そのためNpy5rはマウスモデルにおける機序解明研究の有用な標的となっている。

NPY5-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNpy5r遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Npy5r内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Npy5rのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NPY5-Rタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NPY5-Rシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Npy5r欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NPY5-Rの機能に不可欠なNpy5rエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Npy5rゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NPY5-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNPY5-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Npy5r遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NPY5-R HDRプラスミド（m）および NPY5-R HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNpy5rホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNpy5r標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。