NOXA1 Plasmide Double Nickase (h): sc-416586-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NOXA1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NOXA1 Double Nickase Plasmid (h) e il NOXA1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NOXA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NOXA1 Antibody (H-6): sc-398873
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NOXA1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416586-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NOXA1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416586-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOXA1 (attivatore 1 dell’ossidasi NADPH) codifica una subunità regolatoria che promuove l’attivazione del complesso NOX1 NADPH ossidasi facilitandone l’assemblaggio con p22phox e con le proteine organizer, favorendo così una produzione controllata di specie reattive dell’ossigeno (ROS). La segnalazione ROS dipendente da NOXA1 contribuisce a vie redox-sensibili che influenzano il rimodellamento del citoscheletro, il traffico vescicolare e programmi trascrizionali legati alla proliferazione e alle risposte infiammatorie. In quanto modulatore della segnalazione ossidativa, NOXA1 viene studiata in contesti in cui i ROS incidono sulla funzione di barriera epiteliale e sulla segnalazione dell’immunità innata, e in cui uno squilibrio redox deregolato contribuisce a fenotipi di stress cellulare. Alterazioni dell’attività dell’asse NOX1/NOXA1 sono state investigate in modelli di infiammazione cronica e di segnalazione associata ai tumori, a supporto della sua rilevanza per la ricerca meccanicistica.
NOXA1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NOXA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NOXA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NOXA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NOXA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.